Ujian ELISA: apakah prinsipnya?

Ujian ELISA: apakah prinsipnya?

Definisi: apakah ujian ELISA?

Teknik ujian immunoabsorption enzim yang dipautkan - dalam Bahasa Inggeris Enzyme-Linked Immuno Assay - atau ujian ELISA adalah ujian imunologi yang membolehkan pengesanan atau pengujian molekul dalam sampel biologi. Ia dikonseptualisasikan dan dikembangkan oleh dua saintis Sweden, Peter Perlmann dan Eva Engvall di Universiti Stockholm pada tahun 1971.

Molekul yang diuji dengan kaedah ELISA umumnya protein. Dan jenis sampel termasuk bahan biologi cecair - plasma, serum, air kencing, peluh -, media kultur sel, atau protein rekombinan - protein yang dihasilkan oleh sel yang bahan genetiknya telah diubah oleh penggabungan genetik - dimurnikan menjadi larutan.

Ujian ELISA terutama digunakan dalam imunologi untuk mengesan dan / atau mengukur kehadiran protein, antibodi atau antigen dalam sampel. Ujian serologi ini mengesan antibodi yang dihasilkan oleh badan sebagai tindak balas terhadap pencemaran virus.

Prinsip ujian ELISA untuk penyakit berjangkit

Penggunaan antibodi untuk diagnosis penyakit berjangkit mewakili kaedah yang spesifik dan cepat. Teknik ELISA adalah teknik imuno-enzimatik yang memungkinkan untuk memvisualisasikan, dari sampel biologi, reaksi antara antigen - badan yang dianggap asing oleh organisma hidup - dan antibodi menggunakan reaksi warna yang dihasilkan oleh penanda enzim - amnya alkali fosfatase dan peroksidase - sebelum ini melekat pada antibodi. Tindak balas warna mengesahkan pengenalpastian bakteria terpencil atau adanya virus yang diinginkan dan intensitas warna memberikan petunjuk mengenai jumlah antigen atau antibodi dalam sampel yang diberikan.

Pelbagai jenis ujian ELISA

Terdapat empat jenis ujian ELISA utama:

  • ELISA langsung, memungkinkan untuk mengesan atau mengukur antibodi. Ia hanya menggunakan antibodi utama;
  • ELISA tidak langsung, yang paling banyak digunakan, juga memungkinkan untuk mengesan atau menguji antibodi. Ia menggunakan antibodi sekunder yang memberikan kepekaan yang lebih baik daripada ELISA langsung;
  • ELISA dalam pertandingan, membenarkan dos antigen. Dihasilkan oleh persaingan untuk bon, ia tidak menggunakan enzim;
  • ELISA «dalam sandwic», membenarkan dos antigen. Teknik ini biasa digunakan dalam penyelidikan.

Menggunakan ujian ELISA

Ujian ELISA digunakan untuk:

  • Cari dan ukur antibodi dalam serologi untuk diagnosis penyakit berjangkit: virologi, parasitologi, bakteriologi, dan lain-lain;
  • Protein dos pada kepekatan rendah: dos protein protein tertentu tertentu (imunoglobulin E (IgE), ferritin, hormon protein, dll.), Penanda tumor, dan lain-lain;
  • Dos molekul kecil: hormon steroid, hormon tiroid, ubat…

Kes yang paling biasa: Covid-19, Denggi, HIV, Lyme, alahan, kehamilan

Ujian ELISA digunakan khususnya untuk mendiagnosis banyak penyakit berjangkit:

Penyakit kelamin (STD)

Termasuk hepatitis, sifilis, klamidia dan HIV. Disarankan oleh pihak kesihatan, ini adalah ujian saringan AIDS utama: ia menunjukkan adanya antibodi anti-HIV dan antigen p24 enam minggu selepas jangkitan.

Penyakit serantau atau endemik

Demam kuning, penyakit virus Marburg (MVM), Ladengue, penyakit Lyme, Chikungunya, demam Rift Valley, Ebola, demam Lassa, dll.

Covid-19

Untuk dilakukan lebih dari 2 hingga 3 minggu setelah bermulanya gejala, ujian ELISA memungkinkan untuk mengenal pasti, dalam waktu kurang dari satu jam, kehadiran antibodi anti-SARS-CoV-2.

Patogen virus yang menyebabkan jangkitan pranatal

Toksoplasmosis, rubella, sitomegalovirus, herpes simplex misalnya.

Kes lain

Tetapi dia juga telah menemui aplikasi dalam pengesanan:

  • Kehamilan;
  • Penyakit autoimun;
  • Alergen makanan: penentuan kuantitatif jumlah imunoglobulin E (IgE) membantu dalam penilaian dan rawatan alahan;
  • Gangguan hormon;
  • Penanda tumor;
  • Virus tumbuhan;
  • Dan banyak lagi

Kebolehpercayaan ujian Covid-19

Sebagai sebahagian daripada pengesanan antibodi anti-SARS-CoV-2, kajian rintis yang dilakukan pada bulan Ogos 2020 oleh Institut Pasteur, CNRS, Inserm dan University of Paris mengesahkan kebolehpercayaan ujian ELISA: kedua-dua ujian ELISA diuji penggunaannya keseluruhan protein N SARS-CoV-2 (ELISA N) atau domain ekstraselular lonjakan virus (S) sebagai antigen sasaran. Teknik ini memungkinkan untuk mengenal pasti antibodi pada lebih dari 90% kes, dengan kadar positif palsu yang sangat rendah 1%.

Harga dan pembayaran balik ujian ELISA

Dijalankan di makmal analisis dengan preskripsi perubatan, ujian Elisa berharga sekitar 10 euro dan dibayar balik sebanyak 100% oleh Insurans Kesihatan.

Dibawa dalam pusat maklumat, pemeriksaan dan diagnostik percuma (CeGIDD), mereka boleh bebas dari HIV dan SARS-CoV-2.

Sila tinggalkan balasan anda